核酸定量檢測試劑盒是分子診斷領域的核心工具,廣泛應用于臨床疾病篩查、藥物研發、基因工程及食品安全檢測等場景。其根本目的是對樣本中DNA或RNA的濃度、純度及完整性進行精準測定,為后續實驗(如PCR、測序、文庫構建)提供可靠的數據基礎。
主流試劑盒通常基于熒光染料法或SYBR Green/EB類似物技術。這類試劑利用能與雙鏈核酸特異性結合的熒光染料,在激發光下發出與核酸含量成正比的熒光信號。通過高靈敏度的熒光檢測儀讀取信號值,并結合標準曲線即可計算出未知樣本的絕對濃度。部分高d試劑盒采用單鏈特異性染料,可直接用于RNA定量而無需反轉錄,極大簡化了操作流程。此外,針對微量或痕量樣本,還有基于PicoGreen或RiboGreen的高靈敏度版本,檢測下限可達pg/mL級別。
一、測前準備
清潔雙手:使用流動清水或消毒液清洗雙手,避免污染樣本。
檢查試劑盒:仔細閱讀抗原檢測試劑配套說明書及抗原檢測相關注意事項,檢查抗原檢測試劑是否在保質期內,檢查鼻拭子等內容物是否有缺失或破損。如發現試劑過期或試劑內容物缺失,應及時更換。
準備環境:確保操作環境干凈、整潔、通風良好,保持室內溫度在14至30攝氏度之間(產品保存溫度要在2至30攝氏度之間)。
二、樣本采集
擤去鼻涕:使用衛生紙擤去鼻涕,確保鼻腔清潔。
取出鼻拭子:拆開鼻拭子外包裝,避免手部接觸拭子頭。
鼻腔采樣:
頭部微仰,一手執拭子尾部,貼一側鼻孔進入。
沿下鼻道的底部向后緩緩深入1至1.5厘米。
在鼻腔內旋轉至少4圈,停留時間不少于15秒。
使用同一拭子對另一鼻腔重復相同操作。
年齡14歲以上的,可自行進行鼻腔拭子采樣;年齡2到14歲的,應由成人代為采樣。
三、樣本處理
插入提取管:將采集樣本后的鼻拭子立即置于采樣管中,拭子頭在樣本提取液中旋轉至少30秒。
擠壓拭子頭:隔著采樣管外壁擠壓拭子頭至少5次,確保拭子頭液體擠干。
棄去拭子:將拭子棄去,采樣管蓋蓋。
四、加樣檢測
取出檢測卡:撕開測試卡,將其取出,平放桌面上。
滴加樣本:擠壓提取管,將液體垂直滴入檢測卡樣本孔中,通常滴加4滴。
等待結果:靜置15分鐘,等待紅色條帶出現。注意,20分鐘后判讀結果無效。
五、結果判讀
陰性結果:如果檢測卡上只有C線顯色,表示陰性,即樣本中未檢測出新冠病毒抗原。
陽性結果:如果檢測卡上C線和T線都顯色,表示陽性,即樣本中檢測出新冠病毒抗原。此時應盡快聯系社區或醫療機構進行進一步確認。
無效結果:如果檢測卡上C線不顯色,無論T線是否顯色,均表示無效。這可能是由于操作不當或試劑盒失效等原因導致,需要重新檢測。
六、測后處理
妥善處理廢棄物:將使用過的物品(如鼻拭子、采樣管、檢測卡等)按廢棄物進行合理處理,避免造成環境污染和傳播。
繼續做好個人防護:無論檢測結果如何,都應繼續做好個人防護措施,如佩戴口罩、勤洗手、保持社交距離等。
