木質素（Lignin）含量試劑盒說明書

微量法 100管/96樣

注   意 ：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義：

木質素是構成植物細胞壁的成分之一，是由聚合的芳香醇構成的一類物質，存在于木質組織中，主要作用是通過形成交織網來硬化細胞壁。木質素主要位于纖維素纖維之間，起抗壓作用。

測定原理：

木質素中的酚羥基發生乙酰化后在280nm處有特征吸收峰，280nm的吸光值高低與木質素含量正相關。

需自備的儀器和用品：

天平、40目篩，玻璃試管、燒杯、離心機，恒溫水浴鍋、封口膜、烘箱、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、高氯酸，濃硫酸。

試劑組成和配制：

試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：液體100mL×1瓶，4℃保存。

樣品處理：

樣品80℃烘干至恒重，粉碎，過40目篩，稱取約2mg（記為W）于10mL玻璃試管中（務bi用玻璃試管，不可用Ep管）

測定操作表：

計算公式：

標準曲線：y = 0.0347x+0.0068，R²=0.9889

Lignin（mg/g干重）= (ΔA-0.0068)÷0.0347×V反總×10^-3÷W×T=0.0294×(ΔA-0.0068) ÷0.002×50

V反總：反應總體積：1.02mL；W：樣本質量，g；T：稀釋倍數

注意事項：

1. 試劑一有毒性，請操作時做好防護措施，加熱前必須用封口膜密封，以防氣體溢出。

2. 加熱過程中有劇烈反應，震蕩時輕搖，以免壓力過大噴出造成人身傷害。

3. 試劑三具有強刺激性，建議操作過程全部在通風櫥子操作。

4. 取上清加試劑三步驟根據自己樣品乙酰化程度，試劑三的用量可調整，保證吸光值在0.1-0.8之間即可，并在公式中參與計算。